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?hlf参与了癌细胞生长培养基的营养代谢，这是hlf抑制nsclc细胞生长的前提条件。

?在低营养条件下观察nsclc细胞hlf对葡萄糖、脂肪酸和蛋白质的影响。如补充图6a，hlf表达的改变并不影响总蛋白含量。然而，hlf的上调降低了葡萄糖、甘油三酯的消耗和乳酸的分泌，但增加了游离脂肪酸的水平(图4f–i)。

?矛盾的是，上调hlf增加了细胞内atp的总产生和ldh的活性(补充图6b和c）。这些发现表明，在低营养条件下，过表达hlf的癌细胞更容易发生有氧代谢而不是厌氧代谢，这进一步支持了上调hlf降低乳酸脱氢酶(ldh)的活性，厌氧糖酵解限速酶，一些厌氧糖酵解和乳酸发酵相关基因，但增强了多个三羧酸循环相关基因(。

?相反，沉默hlf则表现出相反的代谢特性，促进了nsclc细胞的厌氧代谢(图4f-i和补充图6c和d)。上诉结果表明，低表达hlf促进非小细胞肺癌细胞的厌氧代谢。

?事实上，即使在氧含量正常的情况下，癌细胞也表现出葡萄糖代谢特征的改变，更倾向于无氧代谢，这一现象被称为“瓦伯格效应”。综上所述，我们的结果表明，低表达hlf可促进nsclc细胞从三羧酸循环向厌氧代谢的首选代谢途径的转换，从而进一步促进细胞在低营养条件下的生长。

?为了进一步确定低营养条件下hlf抑制nsclc生长和转移的潜在机制，我们将多个信号通路的荧光素酶报告质粒转染到nsclc细胞中。如图5a所示，上调hlf显著增强了nsclc细胞ppar信号活性，抑制了nf-kb信号活性;相反，沉默hlf则产生相反的效果(图5a)。

?基于tcga的nsclc数据集中hlf的表达进行了基因集富集分析(gsea)，结果显示hlf的表达水平与ppar信号呈正相关，而与nf-kb信号呈负相关。根据gsea分析，hlf表达与脂质氧化和糖酵解显著相关(补充图6f)。

?重要的是，一些证据表明，hlf通过增加脂解诱导的游离脂肪酸积累，参与ppar的易位和激活，通过破坏p65与靶dna的结合，nf-kb信号通路广泛参与了癌症的进展和转移。ppar信号通路由pparα、pparβ/δ和pparγ等几个家族成员组成。因此，确定参与hlf抑制nf-kb信号通路以及nsclc肿瘤发生和转移的特异性ppar成员至关重要。

?首先，检测10对nsclc组织中pparα、pparβ/δ和pparγ的表达水平。如补充图6g和h，pparα在4/10对组织中表达显著下调，pparγ在8/10对表达，而pparβ/δ在8/10对组织中表达上调。已有广泛报道称pparα和pparγ在nsclc中起肿瘤抑制信号的作用，而据报道pparβ/δ对起致癌作用。

?westernblot分析一致显示，hlf的上调增加了pparα和pparγ的总表达和核易位，增加了ikbα的表达，但降低了磷酸化的nf-kb和p65的总水平和核水平。相反，沉默hlf则发挥了相反的作用。因此，我们的研究结果表明，hlf在nsclc中激活pparα和pparγ，抑制nf-kb/p65信号通路。

?我们使用pparα激动剂非诺贝特、pparγ激动剂吡格列酮和nf-kb信号抑制剂ly2409881，进一步研究了pparα/pparγ/nf-kb/p65信号轴在hlf在nsclc细胞中的功能作用中的意义。

?我们的结果显示，在hlf沉默的细胞中，非诺贝特和吡格列酮显著上调了ppar的活性，而ly2409881则没有上。

?然而，非诺贝特、吡格列酮和ly2409881差异降低了hlf沉默细胞中nf-kb信号的活性。

?重要的是，非诺贝特、吡格列酮和ly2409881减弱了hlf下调对细胞非锚定生长和抗缺氧能力的刺激作用。相反，非诺贝特、吡格列酮和ly2409881逆转了低营养条件下hlf下调对nsclc细胞的促增殖（克隆生长）和抗凋亡作用